黄地老虎颗粒体病毒enhancin-like基因的表达与增效功能研究
增效蛋白(ENHANCIN)是一种主要在昆虫杆状病毒中存在的杀虫增效因子,黄地老虎颗粒体病毒(Agrotis segetum granulovirus,AgseGV)基因组中有一个ORF的编码产物为杆状病毒ENHANCIN同源物,命名为enhancin-like.生物信息学分析结果表明,AgseGV的enhancin-like基因编码产物含有ENH ANCIN的保守域,无信号肽序列,不存在a螺旋跨膜区,在其C-末端拥有类似哺乳动物的脯氨酸富集区.为了确定AgseGV的ENHANCIN-like蛋白是否具有增效功能,构建了AgseGV的enhancin-like全基因和5′端片段(1017bp)的原核表达载体.利用层析技术纯化截短片段的原核表达产物,以其为抗原制备了抗体.利用自制抗体和His-tag抗体,Western blot检测了enhancin like全基因的表达产物.结果表明,在融合蛋白预期大小处显示出阳性条带,证明目的基因得到了良好的表达.以棉铃虫为供试虫进行生物测定,证明在棉铃虫核多角体病毒(HaNPV)浓度为1.17×102 PIBS/mL时,AgseGV enhancin-like的全基因原核表达产物能使其感染3龄初幼虫的死亡率提高16.25％,增效作用显著.但是,5′端截短片段的原核表达产物对HaNPV没有增效作用.
黄地老虎颗粒体病毒、增效蛋白、原核表达、Western blot、棉铃虫核多角体病毒
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S435.622(病虫害及其防治)
国家自然科学基金;新世纪优秀人才支持计划
2012-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
258-264
