人乳头瘤病毒16型E7蛋白的原核表达与鉴定
本研究在大肠杆菌BL21中融合表达人乳头瘤病毒16型E7蛋白,并初步评价其应用价值.采用PCR技术扩增出HPV16 E7基因,将其克隆进原核表达载体pGEX6p-1,转化至大肠杆菌BL21,利用IPTG进行诱导表达.以纯化的融合蛋白作为检测抗原建立间接ELISA方法,用于检测重组李斯特菌(Lm1-2-E7)免疫小鼠后的E7血清抗体水平.在25℃,0.5mM IPTG诱导下,HPV16 E7蛋白在大肠杆菌BL21中获得表达,融合蛋白以可溶性形式存在,Western blot结果显示其与HPV16 E7单克隆抗体发生特异性反应.二次免疫后小鼠血清经间接ELISA结果表明E7特异性抗体滴度为1:200.结果表明GST-E7融合蛋白具有较强的免疫活性.
人乳头状瘤病毒16型、E7蛋白、原核表达、蛋白质印迹、ELISA
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R373.9(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家973计划2012CB518805;长江学者和创新团队发展计划;江苏高校优势学科建设工程资助项目
2012-03-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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