牛副流感病毒3型HN基因原核表达及间接ELISA方法建立
用构建的HJ-1株牛副流感病毒3型HN基因原核表达载体pQE30-HN,在E.coli XL1Blue中表达了重组HN蛋白,并用电洗脱方法从电泳凝胶中纯化了该重组蛋白作为包被抗原,建立了检测该病毒抗体的ELISA方法.建立的ELISA最佳工作条件分别是:抗原浓度为6μg/mL,血清稀释度为1:50,封闭液为5％脱脂奶粉,封闭条件为37℃60min,酶标抗体工作浓度为1:10 000;阳性临界值为OD450≥0.30.该方法与病毒中和试验符合率高达96％,板内和板间重复性试验变异系数均小于10％,重复性较好.该方法与牛冠状病毒、传染性鼻气管炎病毒和呼吸道合包体病毒阳性血清无交叉反应.应用该方法检测黑龙江省部分地区323份奶牛血清样本,对牛副流感病毒3型抗体血清阳性率为57.89％.该ELISA方法的成功建立为进一步研发ELISA试剂盒提供了技术基础.
牛副流感病毒3型、HN蛋白、原核表达、ELISA
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S852.65(动物医学（兽医学）)
黑龙江省科技厅项目;哈尔滨医科大学伍连德青年;黑龙江省卫生厅项目
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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