狂犬病病毒糖蛋白重组人腺病毒的构建及免疫效果的初步研究

摘要：

摘要：构建表达狂犬病病毒弱毒SRV9糖蛋白(GP)的重组人5型腺病毒，检测其对小鼠的免疫效果。将狂犬病病毒SRV9株GP基因的完整开放阅读框克隆到腺病毒表达系统中的穿梭质粒多克隆位点，构建重组穿梭质粒pacAdS CMV-Gs9，以罗氏转染液介导线性化骨架质粒和重组穿梭质粒共转染293AD细胞，细胞病变后取培养物进行PCR鉴定并电镜观察，在293AD细胞上测定病毒滴度。以106 TCID50重组腺病毒腹腔接种昆明小鼠，免疫后不同时段采尾静脉血通过荧光抗体病毒中和试验(FAVN)检测小鼠血清狂犬病中和抗体效价。正确构建重组穿梭质粒pacAd5 CMV-Gs9；获得表达狂犬病病毒SRV9株GP蛋白的缺陷型重组人5型腺病毒；病毒滴度达到106 CFU/mL以上；腹腔接种小鼠14d后均产生了抗狂犬病中和抗体，有效保护率达90％。成功获得了表达狂犬病病毒GP基因的重组腺病毒，该腺病毒免疫小鼠可产生保护性中和抗体，为进一步开发新型兽用狂犬病疫苗奠定了物质基础。

关键词：狂犬病病毒、糖蛋白、重组腺病毒、免疫

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30972199

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：442-446