人乳头瘤病毒6b型E7蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

摘要：

摘要：进行人乳头瘤病毒6b型(Human papillomavirus type 6b，HPV6b) E7蛋白原核表达并制备其多克隆抗体。用已构建的pGEX-4T-2/HPV6b E7原核表达载体诱导表达大量可溶性融合蛋白GST-HPV6b E7，用GlutathioneSepharose 4B亲和柱和凝血酶纯化获取HPV6b型E7蛋白。将纯化的E7蛋白免疫新西兰兔并纯化为多克隆抗体IgG。采用Western-Blot及免疫荧光法分析该抗体的效价及特异性。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分析显示，异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导3～6h后pGEX-4T-2/HPV6b E7表达载体在大肠杆菌中高水平表达可溶性融合蛋白。纯化的E7蛋白免疫新西兰兔后可获得兔多克隆抗体IgG。经Western-Blot及免疫荧光鉴定，兔抗IgG具有高效价性和抗HPV6b E7蛋白特异性。获取纯化的HPV6b型E7蛋白具有较好的免疫原性，其免疫兔产生的多克隆抗体IgG效价高，特异性好，有望进一步用于HPV6b型的生物学功能研究和免疫学效应研究。

关键词：人乳头瘤病毒、E7蛋白、多克隆抗体

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;浙江省卫生高层次创新人才培养计划

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：416-420