HCoV-NL63N蛋白不同片段的表达纯化及血清学检测应用分析

摘要：

将HCoV-NL63核衣壳蛋白N端(Np 1～154aa)、C端(Cp 141～306aa)基因片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上进行原核表达,制备相应的纯化蛋白Np、Cp蛋白,利用Np、Cp蛋白建立基于Western-Blot条带印迹的HCoV-NL63抗体检测法,并与基于全长N蛋白(Nf)的HCoV-NL63抗体检测法相平行筛查了50份成年体检血清.结果显示:50份成年体检血清中,采用Nf、Np、Cp分别检出25、27、36份HCoV-NL63抗体阳性血清,检出率分别为50%、54%、72%.不同N蛋白与血清反应抗体阳性谱存在差异,其中Np与Nf检出一致率为64%,Cp与Nf检出一致率为54%,而Np与Cp检出一致率为54%.本研究表明人冠状病毒NL63在我国人群中感染常见,N蛋白C端(Cp)检出率比全长N(Nf)及N端(Np)要高,Nf、Np、Cp在抗体检测上存在不一致性.这为HCoV-NL63血清学试剂研发及免疫学研究提供了依据与实验基础.

关键词：HCoV-NL63、原核表达、核衣壳蛋白、Western-Blot条带印迹、血清学检测

所属期刊栏目：27

分类号：R446.61(诊断学)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;国家科技重大专项

在线出版日期：2011-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：244-249