应用ELISPOT方法筛选确定HIV-1B”/C亚型疫苗六种抗原的H-2d限制的T细胞表位

摘要：

为了筛选和确定用于检测表达HIV-1B”/C亚型病毒6种抗原(gp160、gag、pol、rev、tat和nef)的艾滋病疫苗免疫小鼠后H-2d限制的特异性T细胞表位,本研究使用表达上述6种抗原的复制型DNA疫苗和非复制型重组痘苗病毒疫苗联合免疫BALB/C小鼠,通过矩阵设计将HIV-1 B(C)亚型6种相应抗原全序列肽库分别混合成肽池,使用肽池对免疫小鼠进行IFN-γ ELISPOT检测,根据检测结果确定肽库中特异反应的优势表位肽.结果显示:筛选到七条针对Gag的特异表位肽,其中有5条与文献报道相同,另2条为新表位肽;筛选到3条针对Pol蛋白特异表位肽,其中一条为新表位肽;筛选到2条针对gpl60特异表位肽,其中一条为新表位肽;在Nef肽库中筛选到一条新的表位肽;从Tat肽库中筛选到3条表位肽.这三条肽在肽库中是连续的序列,都包含(或部分包含)网上公布的表位序列;在Rev肽库中没有筛选到能够产生阳性反应的特异性表位肽.本研究使用IFN-γ ELISPOT方法筛选和确定了可用于检测表达HIV-1 B/C亚型病毒6种抗原(gp160、gag、pol、rev、tat和nef)的艾滋病疫苗免疫小鼠后H-2d限制的特异性T细胞表位.

关键词：HIV-1、B’/C亚型、IFN-γ ELISPOT、T细胞表位、H-2d限制

所属期刊栏目：27

分类号：R373.9;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：CIPRA项目1U19 A151915 01;863项目2003AA219080;”十一五”重大专项2008ZX10001-012

在线出版日期：2011-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：34-43