共表达猪瘟病毒E2基因和猪白细胞介素2基因的重组腺病毒的构建及其免疫原性研究

摘要：

为研制猪瘟活载体疫苗,构建共表达猪瘟病毒E2基因和猪白细胞介素2基因的重组腺病毒并研究其免疫原性.应用PCR方法从pMD19-T-E2质粒和pMD19-T-pIL2质粒中分别扩增E2基因和pIL-2基因,将扩增的全长E2基肉和pIL-2的编码区基因序列通过柔性接头序列(5个甘氨酸密码子)串联,插入腺病毒穿梭载体AdTrack中,在受体菌中与骨架载体AdEasy同源重组.重组质粒AdEasy-E2-pIL-2转染HEK293细胞,包装出重组腺病毒rAd-E2-pIL-2.用rAd-E2-pIL-2免疫家兔,经兔体交互免疫试验评定其免疫效果.结果显示,经RT-PCR和Western blot检测,成功构建了rAd-E2-pIL-2,重组病毒滴度达108.12PFU/mL.rAd-E2-pIL-2接种家兔后刺激接种兔产生猪瘟病毒特异性抗体,淋巴细胞转化试验结果显示猪瘟病毒诱导兔淋巴细胞特异性增殖,攻毒后rAd-E2-pIL-2接种兔和猪瘟病毒C株接种兔均未出现定型热反应.研究结果表明,rAd-E2-pIL-2免疫兔可以预防猪瘟病毒C株接种引发的体温反应,rAd-E2-pIL-2可望成为猪瘟候选疫苗.

关键词：猪瘟病毒、E2基因、猪白细胞介素2、重组腺病毒、细胞因子佐剂

所属期刊栏目：26

分类号：S85.65+9.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：”863”重大项目2006AA10A204

在线出版日期：2010-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：385-391