针对NSP4基因的shRNA抑制牛轮状病毒的体外增殖

摘要：

本研究根据牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)的NSP4基因序列,设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89,利用脂质体介导法,将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞,包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV,以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照,48h后与LacZ shRNA对照比较,RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明,针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明,在转染50%、75%、95%RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中,病毒滴度分别是对照组的50%、20%和10%.上述实验结果表明,针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因,并且能阻断牛轮状病毒增殖.

关键词：BRV、shRNA、NSP4基因

所属期刊栏目：26

分类号：S852.65+9.4;Q78(动物医学（兽医学）)

资助基金：岗位科学家项目;国家转基因生物新品种培育重大专项;山东省自然科学基金;山东农科院重大成果培育基金;山东省农业重大应用技术创新项目;山东省自然科学基金

在线出版日期：2010-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：244-248