表达siRNA的重组腺相关病毒载体的构建和鉴定

摘要：

腺相关病毒(AAV)载体介导的RNA干扰(RNAi)可在哺乳动物细胞中长期特异性抑制同源基因表达.本研究以AAV Helper-Free System中的转移质粒pAAV-MCS为基础,引入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和H1启动子,将该质粒改造为可表达小干扰RNA(siRNA)和EGFP的质粒pAAV-EGFP-H1.该质粒与辅助质粒共转染包装细胞后,获得了具有感染性的重组AAV(rAAV).以EGFP为靶基因的干扰实验证明;所得rAAV可以产生siRNA并能够特异性抑制EGFP靶基因表达;荧光显微镜观察、FACS分析和Real-timePCR方法均表明重组病毒rAAv-H1-shEGFP引起EGFP的表达降低大于60%.

关键词：RNA干扰、H1启动子、腺相关病毒

所属期刊栏目：26

分类号：S858.28;S852.65(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2010-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：216-222