果子狸源呼肠孤病毒的分离鉴定

摘要：

在广东省采集的果子狸样品共192份,处理后接种Vero-E6细胞,从中分离到1株病毒.该病毒在Vero-E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变,表现为细胞内颗粒增多,细胞收缩、变圆,最后细胞从瓶壁脱落.经电镜观察发现,病毒粒子无囊膜,有双层衣壳,呈正二十面体对称,具有呼肠孤病毒的形态特征,将病毒命名为MaskedPalm Civet/(China/2004(MPC/04).红细胞凝集试验表明该病毒能凝集健康人O型血红细胞,不能凝集SPF鸡、实验用普通级牛、大鼠和豚鼠的红细胞,这与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型的红细胞凝集谱相符.理化特性试验表明该病毒对氯仿有抵抗力;能耐受Ph3.0的酸性环境;50℃水浴1h病毒未丧失感染能力;1 mol/L MgCl2能提高病毒对热的抵抗力.为了进一步从分子水平上证实该病毒是呼肠孤病毒,用哺乳动物呼肠孤病毒特异性引物进行反转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR),扩增得到了预期大小的片段.测序结果经NCBI BLAST比较,选取同源性较高者进行序列同源性分析,发现该片段与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型参考毒株核苷酸同源性最高.以上结果证明该病毒为呼肠孤病毒科的成员.

关键词：果子狸、呼肠孤病毒、分离、鉴定

所属期刊栏目：24

分类号：R37;R44

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划;新发传染病病原体分离鉴定技术的前期探索研究2005CB522905

在线出版日期：2008-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：376-382