靶向HIV-1 vif的高效siRNA的筛选及慢病毒介导的体外抗病毒研究

摘要：

RNAi技术在艾滋病治疗研究中已展现出巨大的潜力,兼具高效抑制特性和保守性的siRNA靶位是其获得成功应用的重要基础.本研究选择以HIV-1 vif基因为靶区筛选高效保守的RNAi序列,共选择设计了30个识别不同位点的siRNA序列,以pSUPER为载体构建了相应的shRNA表达质粒.通过与pNL4-3质粒在293FT细胞中进行共转染抑制实验,以及对初筛获得的高效序列进行保守性分析显示siRNA-vif37序列具有高效抑制效率和较好的保守性特征.通过与pGL3-vif报告质粒的共转染实验证明siRNA-vif37具有vif基因抑制特异性.带有shRNA-vif37表达元件的重组慢病毒转导后的MT-4细胞在HIV-1NL4-3体外攻毒实验中可显示出较有效的抑制病毒复制的能力,本研究进一步对转导后细胞进行克隆化筛选,获得稳定整合shRNA-vif37表达元件的MT-4-vif37细胞克隆,该细胞具有显著的抑制病毒复制的能力,在高攻毒剂量下仍可获得良好的抑制效果.本研究为进一步应用RNAi技术进行新型艾滋病治疗方法研究提供了重要基础.

关键词：RNA干扰、HIV-1、vif、重组慢病毒

所属期刊栏目：24

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：教育部科学技术研究重大项目培育基金705031;福建省自然科学基金2007J0111;病毒性疾病新药研发平台项目2004YZ01;厦门市病毒性疾病新药研发平台建设项目3502220041008

在线出版日期：2008-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：88-95