表达猪γ干扰素的重组腺病毒的构建和活性鉴定

摘要：

以刀豆素A(ConA)诱导的梅山猪外周血淋巴细胞中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆扩增出全长猪γ干扰素基因(PoIFNγ,501bp).测序结果证实扩增得到的PoIFNγ与GenBank上所报道的猪γ干扰素基因同源性为100%.将PoIFNγ插入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV,与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组.在293A包装细胞系中成功包装成完整的病毒粒子.将此重组后的腺病毒连续接种传至第10代,每代提取病毒基因组,PCR均能扩增出目的片段,以细胞病变抑制法(CPE50)测定干扰素生物活性达1.3×106U/mL,证明该种表达猪γ-干扰素的重组腺病毒能稳定传代.

关键词：猪γ-干扰素、克隆、序列分析、腺病毒

所属期刊栏目：23

分类号：S858.28;S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA245071;湖北省科技攻关项目2004AA202B01

在线出版日期：2007-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：394-398