亲和层析法用于噬菌体抗体库的筛选

摘要：

本研究报道一种基于固定化金属亲和层析(IMAC)的噬菌体抗体库液相筛选方法.将纯化的带有His标签的抗原与噬菌体抗体库混合,噬菌体抗体与抗原充分结合后再加入亲和介质,使噬菌体抗体抗原复合物通过His标签与介质结合,然后通过充分洗涤去除非特异性噬菌体抗体,最后将特异性噬菌体抗体洗脱下来,感染TG1,进行下一轮筛选.整个筛选过程中抗原与抗体的结合在液相中完成,不仅消除了固相介质对抗原表位的影响,也更有利于噬菌体抗体与抗原的充分作用.将此方法应用于HEV NE2蛋白特异性人源噬菌体抗体的筛选,抗原竞争ELISA,阳性血清阻断,可溶性单链抗体表达检测及测序结果表明,最终获得2个特异性人源抗体.

关键词：噬菌体抗体库、固定化金属亲和层析、液相筛选

所属期刊栏目：22

分类号：R373;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：福建省科技厅科研项目2002F013;国家创新药物博士基金2003AA2Z3539;福建省自然科学基金C0310005;福建省厦门市科技计划3502Z20055002

在线出版日期：2006-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：44-49