抗J亚群禽白血病病毒的鸡胚成纤维细胞系建立

摘要：

将J亚群禽白血病病毒囊膜基因(ALV-J env)插入pcDNA3.1真核表达载体,构建成转移载体pcDNA-env,并转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,通过Zeocin药物筛选获得转染阳性细胞.细胞经传30代后,冻存.13个月后复苏,置不含药物的培养基中传代培养.连续传40代后,分别用PCR、Southern blot、间接免疫荧光(IFA)及Western blot对该细胞中的env基因进行了检测,并进行了抗病毒感染分析.研究结果表明,通过Zeocin药物筛选获得了稳定表达ALV-J env基因的鸡胚成纤维细胞系,命名为pcDNA-env-DF-1细胞.该细胞在体外抗ALV-J感染试验中,能抵抗1×104个TCID50病毒感染量,提示所构建的细胞系具有良好的抗病毒作用.这一细胞系的构建为研究ALV-J Env蛋白与宿主细胞表面受体相互作用分子机理提供了很好的工具.

关键词：J亚群禽白血病病毒、env基因、表达、细胞系、抗病毒感染

所属期刊栏目：21

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：江苏省教育厅自然科学基金OOKJB230002;国家"火炬计划"2002BA514A-18-7

在线出版日期：2005-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：456-460