载脂蛋白ApoE的原核表达以及与PrP蛋白间相互作用的初步研究

摘要：

利用RT-PCR方法从人源细胞系SH-SY5Y cDNA中扩增出载脂蛋白ApoE基因,并在pET32a载体中表达融合蛋白His-ApoE,以纯化的融合蛋白免疫实验用兔获得特异性抗体,利用ELISA及免疫共沉淀方法对ApoE及PrP之间的相互作用进行研究.结果表明,SDS-PAGE显示表达的His-ApoE蛋白的相对分子量约为54 000,所制备的抗血清ELISA效价可达到1∶406 900,并能够有效地识别重组及动物组织中的内源性ApoE蛋白.ELISA和免疫共沉淀实验均显示,原核表达的ApoE可与全长的PrP蛋白(PrP23-231)在体外发生相互作用,其作用位点可能位于PrP蛋白的N端.这些结果为TSE经血传播的机制研究提供了新思路.

关键词：载脂蛋白ApoE、抗体、PrP蛋白、分子间相互作用

所属期刊栏目：21

分类号：R373;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：中国科学院资助项目30070038;国家高技术研究发展计划863计划30130070;新材料领域项目2001AA215391;欧盟资助项目QLRT200001441;国家"火炬计划"2003BA712A04-02

在线出版日期：2005-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：443-447