肠道病毒71型外壳蛋白VP1在Pichia pastoris酵母中的表达

摘要：

利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白VP1基因,经序列测定证实后,构建重组表达质粒pPIC9K/VP1,转化Pichia pastoris酵母宿主菌GS115,甲醇诱导表达.SDS-PAGE分析显示:表达产物的分子量约为34kD,与天然VP1大小一致.凝胶薄层扫描分析显示:目的蛋白表达量占培养上清总蛋白的60%以上.ELISA实验表明,重组蛋白VP1具有较好的抗原性.使用饱和硫酸铵分级沉淀法初步纯化的表达产物,能够较特异性地与EV71感染者血清中的抗体产生反应,而且与抗柯萨奇病毒A16特异性抗体不产生反应.通过利用表达产物作为抗原,对156份血清的检测初步证实,重组蛋白VP1可以作为检测EV71感染的的检测用抗原.

关键词：肠道病毒71型、VP1、Pichia pastoris酵母、基因表达

所属期刊栏目：19

分类号：R373.3;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：114-117