翻译和非翻译马铃薯Y病毒外壳蛋白基因介导的抗病性比较

摘要：

利用RT-PCR方法克隆获得马铃薯Y病毒烟草叶脉坏死株系(PVYN)的可翻译和不可翻译外壳蛋白(CP)基因,并分别插入pROKⅡ质粒中获得重组双元表达载体.通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的基因转化方法,将可翻译和不可翻译的PVYN-CP基因分别导入烟草栽培品种NC89叶片组织中,得到抗卡那霉素的再生植株.对所得到的抗卡那霉素的再生苗进行PCR检测表明,被导入可翻译和不可翻译CP基因的植株分别占卡那霉素抗性植株的95%和98%.攻毒实验表明,两种类型的转基因烟草对PVYN的抗病性具有相似性,其表现型为:免疫、抗病和感病.免疫型转基因植株的抗病性不受接种物类型及其剂量的影响.Southern印迹杂交结果显示,目的基因已经整合到烟草基因组中.Northern印迹杂交证明,两种类型的CP基因都已在RNA水平上得到了表达,但细胞内RNA的积累量与转基因植株的抗病强度成负相关.Western印迹杂交表明,在表达不可翻译PVYN-CP基因的转基因植株内未检测到CP蛋白,而在导入可翻译的PVYN-CP基因的植株内检测到了CP蛋白,且CP蛋白含量与抗病性不存在正相关.本研究结果证明,表达可翻译与不可翻译PVYN-CP基因的转基因烟草对PVYN的抗病性均为RNA介导的抗病性.

关键词：马铃薯Y病毒、外壳蛋白基因、转基因烟草、RNA介导的抗病性

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分类号：S435.72;Q813.4(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金39970485;山东省自然科学基金22000D02

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：360-367