猪生殖和呼吸综合征病毒B13株ORF7基因的克隆及在杆状病毒系统中的表达

摘要：

利用单管RT-PCR方法扩增猪生殖和呼吸综合征病毒（PRRSV）分离株B13株包括ORF7基因的片段，并对其序列进行了测定，结果PRRSV分离株B13ORF7基因长度为384bp，编码128个氨基酸组成的15kD蛋白。与已发表的PRRSVLV株、VR-2332株进行同源性比较，发现核苷酸同源性分别为99.2%、59.4%；氨基酸同源性分别为98.4%、54.7%。表明PRRSV分离株B13在基因结构上可能与LV株同属于欧洲亚群。同时构建了重组转移载体质粒pAcGHLT-B-ORF7，用该重组转移载体质粒与线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（AcMNPV-SVI－G）基因组DNA（baculogold linearized baculovirusDNA）共转染草地夜蛾（Spodoptcra frugiperda，Sf9）细胞，得到重组病毒AcMNPV-OCC－-GST-6xHis-ORF7。在感染了重组病毒的Sf9细胞中检测到分子量为46kD的ORF7基因的GST融合蛋白表达产物，能被猪抗PRRSVB13株多克隆血清所特异识别。此结果为PRRS新型诊断抗原的研制奠定了基础。

关键词：猪生殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、ORF7基因、测序、杆状病毒表达载体、表达

所属期刊栏目：17

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：75-80