中国HTLV-Ⅰ env基因的克隆及Ⅰ＋Ⅱ型嵌合基因的原核表达与抗原活性检测

摘要：

为尽快研制出国产HTLV抗体诊断试剂，首先从福建HTLV流行区1名HTLV感染者外周血细胞中克隆出HTLV-Ⅰ的全长膜基因（env），继而结合文献报道、PSA软件的亲疏水性分析和EPI软件的B细胞表位分析数据，选择了gp46中段开始延伸至gp21N端212个氨基酸（aa185～aa396）的基因，并在3′端通过（GlySer）2与人工合成的HTLV-Ⅱ型的型特异性表位区基因嵌合，插入原核表达载体pRSET，在E．coli中得到了高效表达，目的蛋白产量约占菌体总蛋白的30%。通过Triton-X100洗涤，低浓度尿素逐步变性处理，8mol/L尿素溶解后纯度在75%左右，经电泳洗脱纯化，最终纯度可达95%左右，纯蛋白得率约40%。经Westernblotting检测，该蛋白对4份HTLV-Ⅰ型和2份HTLV-Ⅱ型血清均有较强反应，而对4份阴性血清无反应，从而有可能用于研制HTLV抗体诊断试剂盒。

关键词：人类T淋巴细胞白血病病毒、膜基因、原核表达、抗原

所属期刊栏目：17

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：教育部科学技术研究项目99179

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：38-42