10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.12.001
黄连碱对人脐静脉内皮细胞内质网应激的影响
目的:建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内质网应激细胞模型,观察黄连碱对HUVECs以及内质网模型细胞生长活性的影响,对CHOP、GRP78基因以及蛋白表达的影响.方法:使用10μg/mL的衣霉素诱导HUVECs 18 h后,加入不同浓度的黄连碱再处理24 h.CCK8法检测不同浓度黄连碱对HUVECs的活性影响以及黄连碱对衣霉素诱导后的HUVECs的活性影响;采用RT-RCR法比较各组细胞中CHOP、GRP78的mRNA的表达情况;采用Western blotting和细胞免疫荧光法比较各组细胞中CHOP,GRP78的蛋白表达情况.结果:随着黄连碱浓度的增加,在1~20μmol/L范围内的黄连碱对HUVECs的活性无影响,浓度为20μmol/L黄连碱作用24 h后,对衣霉素诱导的HUVECs活性具有保护作用(P<0.01).加入衣霉素诱导18 h,HUVECs中CHOP、GRP78 mRNA水平的表达增高(P<0.01),再加入黄连碱继续诱导24 h后,黄连碱可以抑制衣霉素所诱导的HUVECs中CHOP、GRP78 mRNA水平的表达增高(P<0.01).加入衣霉素诱导18 h,HUVECs中CHOP、GRP78蛋白水平的表达增高(P<0.01),再加入黄连碱继续诱导24 h后,发现黄连碱可以抑制衣霉素所诱导的HUVECs中CHOP、GRP78蛋白水平的表达增高(P<0.01),与衣霉素诱导组相比数据具有统计学意义,细胞免疫荧光染色结果与Western blotting结果相似.结论:黄连碱可以减轻由衣霉素诱导的HUVECs过度内质网应激反应,并可提高受损细胞的活性;并可通过下调CHOP、GRP78的表达改善HUVECs过度内质网应激反应.
黄连碱、衣霉素、HUVECs、内质网应激
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R589.2(内分泌腺疾病及代谢病)
国家自然科学基金面上项目;国家自然科学基金青年项目
2020-04-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1577-1581