结核分枝杆菌PPE68基因真核表达载体的构建、表达和鉴定

摘要：

目的:建立结核分枝杆菌PPE68蛋白基因重组质粒的真核表达载体,为以后对PPE重组蛋白的免疫原性分析奠定基础.方法:提取结核分枝杆菌总DNA,PCR法扩增出PPE68编码基因,通过线性T克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)后,转染至HeLa细胞中表达,Western blot鉴定表达产物.结果:PCR产物、pGEM-T-PPE68及pcDNA3.1(+)-PPE68分别经双酶切后均获得同一大小基因片段,表达产物经Western blot鉴定相对分子质量约为40 000.结论:成功构建了结核分枝杆菌PPE68基因真核表达载体,并获得了表达产物.

关键词：结核分枝杆菌、重组抗原、真核表达载体

所属期刊栏目：39

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：安徽省高等学校省级自然科学研究资助项目KJ2009B187Z

在线出版日期：2014-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：288-290,294