原钙黏蛋白10对胃癌顺铂化疗敏感性的影响及作用机制初探

摘要：

目的 探究原钙黏蛋白10(PCDH10)对顺铂化疗敏感的影响及机制.方法 将pcDNA3.1+PCDH10质粒、pcDNA3.1+空质粒分别转染至对数期人胃癌BGC823细胞株,分别作为转染组和空载组,未做处理的细胞作为空白组,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PCDH10 mRNA的相对表达量,蛋白质印记法(Western blot)检测PCDH10蛋白的相对表达量,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,划痕试验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力.取转染组、空载组及空白组细胞加入不同浓度的顺铂溶液,比较各组细胞存活率及顺铂对细胞的半数抑制浓度(IC50);取转染组、空白组细胞加入IC50浓度的顺铂溶液,分别作为转染+顺铂组、顺铂组,比较转染组、空白组、转染+顺铂组、顺铂组细胞磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6)基因及蛋白的相对表达量.结果 转染组细胞PCDH10 mRNA及PCDH10蛋白的相对表达量,均高于空载组和空白组细胞(P﹤0.05).将稳定转染的各组细胞重新接种,转染组细胞培养24、48、72 h时OD值及培养24 h细胞迁移率和穿膜细胞数均低于空载组和空白组细胞(P﹤0.05).顺铂浓度分别为0.500、1.000、2.000、4.000、8.000 μg/ml时,转染组细胞存活率、顺铂对细胞的IC50值均低于空载组和空白组细胞(P﹤0.05).转染组、顺铂组、转染+顺铂组细胞PI3K 、MTOR 、p70S6 mRNA和PI3K、MTOR、p70S6蛋白的相对表达量均低于空白组细胞(P﹤0.05),磷酸化蛋白激酶B(pAKT)/AKT低于空白组细胞(P﹤0.05),转染+顺铂组细胞PI3K 、MTOR 、p70S6 mRNA和PI3K、MTOR、p70S6蛋白的相对表达量均低于空白组细胞(P﹤0.05),pAKT/AKT低于转染组和顺铂组细胞(P﹤0.05).结论 PCDH10过表达可抑制人胃癌BGC823细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并可增强细胞顺铂化疗敏感性,其作用机制可能与下调PI3K 、MTOR 、p70S6 mRNA及PI3K、MTOR、p70S6蛋白表达、抑制AKT磷酸化相关.

关键词：原钙黏蛋白10、胃癌、顺铂、化疗敏感性

所属期刊栏目：18

分类号：R735.2(肿瘤学)

在线出版日期：2020-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：901-906