ubiquilin 4相互作用蛋白的鉴定

摘要：

目的 筛选、鉴定与ubiquilin 4相互作用的蛋白,探讨ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制.方法 利用细胞免疫荧光技术,确定外源及内源ubiquilin 4在MKN45细胞中的定位;构建含有UBQLN4和GST标签的原核表达载体pGEX-UBQLN4,将其转化至大肠杆菌中,6 h后收集蛋白.运用标签纯化ubiquilin 4,利用GST-pull down技术寻找差异条带,再进一步应用蛋白质谱技术鉴定蛋白,并通过免疫共沉淀法进行验证.结果免疫荧光显微镜显示,外源及内源ubiquilin 4均主要定位于细胞核和细胞质.通过纯化及蛋白质谱分析技术鉴定发现,MYH9蛋白与ubiquilin 4存在相互作用.结论 MYH9蛋白与ubiquilin 4存在相互作用,可能为阐明ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制提供重要的依据.

关键词：ubiquilin4、亚细胞定位、GST-pulldown、相互作用蛋白、MYH9蛋白

所属期刊栏目：16

分类号：R730(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81472208;中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目2016-I2M-1-001

在线出版日期：2018-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：554-557,570