SLC-Her-2/neu-P53-Fc融合基因重组腺病毒表达载体的构建及检测

摘要：

目的：构建携带融合基因SLC-Her-2/neu-P53-Fc（SLC-HP-Fc）的重组腺病毒AdEasyTM-SLC-HP-Fc表达载体。方法提取SLC-HP基因及含Fc段基因的质粒构建携带目的基因的腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-SLC-HP-Fc ，经酶切线性化后转入含有pAdEasy-1质粒的E.coli BJ5183中进行同源重组，得到重组腺病毒真核表达载体AdEasyTM-SLC-HP-Fc。线性化后的病毒表达载体通过脂质体Lipofectamine 2000转染293细胞，通过包装扩增并经PCR鉴定后得到大量复制病毒并纯化保存。结果得到重组腺病毒AdEasyTM-SLC-HP-Fc ，成功转染293细胞出现细胞病变反应，经酶切及PCR法确定目的基因的表达。结论成功构建了SLC-Her-2/neu-P53-Fc融合基因重组腺病毒表达载体，并建立了重组腺病毒AdEasyTM-SLC-HP-Fc种子病毒库和工作病毒库，为进一步研究该融合基因与肿瘤相关作用奠定了实验基础。

关键词：c-erbB-2、p53、趋化因子SLC、重组腺病毒、表达载体

分类号：R730(肿瘤学)

在线出版日期：2014-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：365-369,374