稀有密码子影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白原核表达

摘要：

通过限制性内切酶克隆法构建两个pET 28a TAT-RNaseH-Apaf1重组质粒,其中一个质粒经过稀有密码子的优化.将两个重组质粒分别转化原核表达宿主菌BL21 (DE3)和Transetta(DE3),通过SDS-PAGE观察相应融合蛋白诱导表达的情况,并用His标签抗体和Apaf1抗体通过Western Blotting鉴定诱导蛋白.菌液PCR和测序证明经稀有密码子优化和未经稀有密码子优化的人源RNaseH-Apaf1序列成功重组到pET-28a-TAT载体中;经稀有密码子优化的重组质粒成功地在大肠杆菌宿主菌中表达RNaseH-Apaf1融合蛋白,并用Western Blotting检测到该融合蛋白.结果表明,稀有密码子可影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白的原核表达.

关键词：稀有密码子、RNaseH-Apaf1融合蛋白、原核表达

所属期刊栏目：37

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2015-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：72-78