影响PVDF膜对蛋白吸附效率的主要因素

摘要：

通过结合有抗原的PVDF膜进行亲和纯化是小规模快速获取特异性抗体的一种重要手段.该方法的关键步骤之一是将抗原蛋白有效地吸附到PVDF膜上.尽管人们广泛使用PVDF膜亲和纯化抗体,但对影响PVDF膜吸附抗原蛋白的因素至今仍缺乏系统研究.以BSA为模型蛋白,检测在不同蛋白浓度、不同孵育时间、不同溶质溶液和不同pH值的情况下,PVDF膜吸附蛋白的效率.当蛋白溶液为PBS时,1 cm2 PVDF膜与2 mg·mLl BSA溶液孵育1h可达到其最大吸附率.常见的蛋白质缓冲液组分对PVDF膜的蛋白吸附率影响不一.其中,咪唑、Tris-HCl、NaCl、KCl在广泛的浓度范围内对PVDF膜吸附蛋白没有明显影响,而较高浓度的SDS、Triton-X 100、Tween-20、乙二醇、甘油、盐酸胍、尿素等可显著降低PVDF膜对蛋白的吸附效率,在pH为6.5～9.5的Tris-HCl中,随着pH的增高而吸附效率降低.

关键词：抗体纯化、PVDF膜、蛋白吸附

所属期刊栏目：37

分类号：Q-33(生物科学的研究方法与技术)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金2014PY003

在线出版日期：2015-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：51-56