血管软化丸调控miRNA-467b抗动脉粥样硬化的作用与初步机制研究

摘要：

目的 探讨中药复方血管软化丸通过miRNA-467b靶向脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)调控巨噬细胞,减少白细胞介素(interleukin,IL)-6,IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)等炎症因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用与初步机制.方法 将RAW264.7巨噬细胞随机分为5组,即对照组、模型组、miR-467b mimic组、中药高剂量含药血清组、中药低剂量含药血清组;经干预后,采用RT-PCR检测巨噬细胞中pri-miR-467b和LPL mRNA表达;采用高效液相色谱法检测巨噬细胞内胆固醇水平.连续4周高脂饲料(含脂肪21％、胆固醇0.15％)饲养ApoE-/-小鼠复制动脉粥样硬化模型,模型复制成功后,中药高、低剂量组每日分别灌胃血管软化丸86.4、21.6 g/kg,连续给药12周;对照组、模型组每日灌胃0.9％生理盐水86.4 g/kg.采用免疫组织化学法检测主动脉LPL蛋白表达水平,RT-PCR检测主动脉pri-miR-467b和LPL mRNA表达水平;采用ELISA法检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1水平.结果 与对照组比较,模型组巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达水平和巨噬细胞内游离胆固醇(free cholesterol,FC)水平均明显降低(P<0.05),巨噬细胞内LPL mRNA及其蛋白表达水平以及总胆固醇(total cholesterol,TC)、胆固醇酯(cholesterol ester,CE)水平均明显升高(P<0.05).血管软化丸能够无剂量依赖性地升高巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达水平和巨噬细胞内FC水平(P<0.05),降低巨噬细胞中LPL mRNA及其蛋白表达水平以及TC、CE水平(P<0.05).血管软化丸能够升高主动脉pri-miR-467 b mRNA表达水平(P<0.05),降低主动脉中LPL mRNA及其蛋白表达水平以及血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1水平(P<0.05).结论 血管软化丸抑制动脉粥样硬化斑块形成的作用机制可能与调控miR-NA-467 b靶向LPL调控巨噬细胞,减少IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1等炎症因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积相关.

关键词：动脉粥样硬化、血管软化丸、miRNA-467b、巨噬细胞

所属期刊栏目：39

分类号：R972+.6(药品)

资助基金：河南省中医药科学研究专项重点课题;国家自然科学基金项目;河南省中医药科学研究专项重点课题

在线出版日期：2020-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：66-71