Polo样激酶1在肝细胞肝癌中的作用及临床意义

摘要：

目的 探讨PLK1在肝细胞肝癌中的表达、对肝癌细胞生物学行为的影响及临床转化意义.方法 使用TCGA数据库分析PLK1 mRNA在369例肝细胞癌肿瘤患者组织及160例患者癌旁组织中的表达及对无病生存期的影响.提取川北医学院附属医院肝胆外一科2019年1～6月收治的30例肝细胞癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PLK1的mRNA表达水平进行验证.选取HepG2细胞系进行功能实验,分别使用小干扰及GSK461364处理,Western blot实验检测PLK1小干扰RNA敲低效率,检测不同处理肝癌细胞生物学行为变化;流式细胞术检测不同处理细胞周期改变.使用HepG2细胞构建裸鼠皮下成瘤模型,分别给予50 mg/kg GSK461364腹膜注射和等体积生理盐水腹膜注射,20 d后收获皮下肿瘤,进行后续的拍照及免疫组化染色,比较移植瘤体积及Ki-67染色阳性率.提取数据库中患者两年随访资料,同时以PLK1表达中位值为界,将患者分为PLK1高表达组及低表达组,并采用log-rank检验进行生存分析.结果 TCGA数据库分析结果显示,PLK1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织log2(TPM + 1)值分别为(2.3±7.5)、(0.8±2.7),差异有统计学意义(P＜0.05).生存分析显示,PLK1高表达组无病生存期低于PLK1低表达者,差异有统计学意义(P＜0.05).肝癌肿瘤组织标本分析PLK1 mRNA表达结果显示,PLK1在肿瘤组织中的表达为(2.4±1.0)高于癌旁组织(1.3±0.8),差异有统计学意义(P＜0.001).使用两条siRNA敲低HepG2细胞中PLK1的表达,敲低效率分别为(71.3±4.8)%、(65.3±5.3)%,细胞增殖、平板克隆形成及细胞周期实验结果显示,与siCtrl组相比,siPLK1-1、siPLK1-2组肝癌细胞HpG2的细胞相对活力明显降低,细胞克隆数减少,HepG2细胞周期阻滞在G2期,差异均有统计学意义(P＜0.001).使用PLK1特异性小分子抑制剂GSK461364处理HepG2细胞,IC50=25.0 nM,CCK8、平板克隆形成及细胞周期实验结果显示,与DMSO组相比,GSK461364组HpG2的细胞相对活力明显降低,细胞克隆数明显减少,HepG2细胞周期阻滞在G2期,与小干扰结果一致,差异均有统计学意义(P＜0.05).裸鼠体内成瘤实验结果显示,相对于生理盐水注射组,GSK461364注射组小鼠的移植瘤体积明显减小[(328.3±28.4)mm3比(527.7±26.5)mm3];Ki-67阳性率明显减少,[(52.5±1.9)%比(15.2±1.9)%],差异均有统计学意义(P＜0.05).而体质量无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05).结论 PLK1在肝细胞肝癌中高表达,与患者的总体生存率呈负相关,抑制其表达可显著降低肝癌细胞的增殖能力,减慢肝细胞肝癌进展,可作为肝细胞肝癌的潜在治疗靶点.

关键词：Polo样激酶1、小分子抑制剂、肝细胞肝癌、增殖抑制、诊疗靶点

所属期刊栏目：44

分类号：R734.2;R329.28;R5

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1173-1179