选择性MAO-B抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞自噬和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨选择性单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞体外自噬及凋亡的影响.方法 正常培养胶质瘤细胞株U87,随机分为6组:对照组不做处理,5、10、25、50、100 μmoL/L TM-5组分别予以5、10、25、50、100 μmoL/L TM-5处理细胞,每组设3个复孔.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测促凋亡蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的基因表达;蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞凋亡相关蛋白Bax和切割后半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)以及自噬相关标志蛋白Beclin-1、自噬相关蛋白1轻链-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和P62 表达.结果 与对照组比较,10、25、50、100 μmoL/L TM-5组U87细胞存活率降低(P<0.05),选取5、10、25 μmoL/L TM-5组(细胞存活率＞50%)进行后续实验.与对照组比较,10、25 μmoL/L TM-5组相对细胞凋亡率、细胞中LC3-Ⅱ和Bax蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05);5、10、25 μmoL/L TM-5组U87细胞中促凋亡基因Bax mRNA相对表达水平、Beclin-1和cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高,抑凋亡基因Bcl-2 mRNA、P62蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TM-5可抑制胶质瘤U87细胞存活,可上调Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax和cleaved caspase-3,下调Bcl-2和P62表达,诱导细胞自噬和凋亡.

关键词：TM-5、选择性MAO-B抑制剂、胶质瘤、细胞增殖、细胞凋亡、自噬

所属期刊栏目：44

分类号：R734.2;R329.1;R285.5

资助基金：河南省医学科技攻关计划联合共建项目;河南省科技厅科技攻关项目

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1163-1167