亚低温对OGD/R模型新生大鼠海马神经元损伤的保护分子机制研究

摘要：

目的 观察亚低温(MH)对新生大鼠海马神经元氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 体外培养新生大鼠海马神经元,将实验细胞随机分为对照组、OGD/R组、OGD/R+MH组和OGD/R+MH+Chl组;OGD/R组神经元给予OGD处理6 h,再于37℃复糖复氧处理24 h建立OGD/R模型.OGD/R+MH组和OGD/R+MH+Chl组神经元均给予OGD处理6 h,再分别于32℃不加或加氯喹(Chl)条件下复糖复氧处理24 h.收集各组复糖复氧处理24 h后的细胞及细胞培养上清液;采用电镜观察神经元超微结构变化,MTT法检测神经元活力,ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,TUENL染色法检测神经元凋亡情况,West-ern blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3剪切体(Cleaved caspase-3)、聚ADP核糖聚合酶剪切体(Cleaved PARP)、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、泛素结合蛋白P62、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)表达水平.结果 与对照组比较,OGD/R组出现明显的细胞器损伤、降解、线粒体肿胀等神经元损伤表现,神经元活力下降、LDH漏出率增加、凋亡神经元增多(P<0.05),凋亡标志物Cleaved caspase-3、Cleaved PARP表达升高(P<0.05),LAMP2、P62蛋白表达降低,LC3Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05).MH干预后,OGD/R+MH组较OGD/R组细胞器损伤减轻,神经元活力升高、LDH漏出率减少、凋亡神经元减少(P<0.05),凋亡标志物Cleaved caspase-3、Cleaved PARP表达降低(P<0.05),LAMP2蛋白表达升高,P62、LC3Ⅱ蛋白表达降低(P<0.05).而OGD/R+MH+Chl组同时给予MH和自噬通量抑制剂Chl干预后,MH的上述作用被逆转(P<0.05).结论 MH可能通过改善自噬通量、增加海马神经元自噬活性,从而减轻OGD/R所致的神经损伤.

关键词：海马神经元、新生大鼠、氧糖剥夺/复糖复氧、亚低温、自噬通量

所属期刊栏目：44

分类号：R742.1;R285.5;R971

在线出版日期：2023-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：629-634