miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响

摘要：

目的 探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因.方法 购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人卵巢上皮细胞HOSEpiC以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平.利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3'端非编码区(3'-UTR)的野生型(WT)和突变型(mut)荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用.利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SK-OV3细胞,使用荧光定量PCR和Western blot检测靶基因的表达水平.利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化.结果 正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义(P<0.05),选择SKOV3进行后续实验.生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3'-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3'-UTR.筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组.在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SK-OV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05).细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义(P<0.05).Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

关键词：卵巢癌、miR-125a-5p、增殖、迁移、侵袭

所属期刊栏目：40

分类号：R737.31;R285.5;R373.31

在线出版日期：2019-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：961-965