miRNA-381靶向HMGB1对IHH-4细胞生长侵袭及迁移的影响

摘要：

目的 探究微小RNA-381(miR-381)调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞生长、侵袭及迁移的影响.方法 购置甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞及正常甲状腺细胞Nthy-ori-3各1株,取第3代细胞培养48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-381和HMGB1在甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞和正常甲状腺Nthy-ori-3细胞中的表达水平.利用Lipofectamine 2000转染miR-381 mimic后,检测IHH-4细胞中miR-381和HMGB1的表达水平.生物信息学预测miR-381和HMGB1的靶向关系,并用荧光素酶报告实验验证两者的靶向关系.每孔按2×105/mL细胞密度接种IHH-4细胞,分为IHH-4组(甲状腺乳头状瘤细胞IHH-4组)、miR-381 mimic组(miR-381 mimic转染组)、pc-HMGB1组(HMGB1过表达转染组)、mimic+pc-HMGB1组(miR-381 mimic和pc-HMGB1共同转染组),每组设3个复孔,采用CCK8法检测各组IHH-4细胞活性,Transwell及划痕实验分别检测IHH-4细胞侵袭及迁移能力,免疫印迹法检测IHH-4细胞中Ki67、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9和晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达水平.结果 与Nthy-ori-3细胞比较,IHH-4细胞中miR-381 mRNA水平降低,HMGB1 mRNA水平升高,差异有统计学意义(P<0.01).与IHH-4组相比,miR-381 mimic组miR-381表达增加(P<0.01).miR-381和HMGB1存在靶向关系.与IHH-4组相比,miR-381 mimic组细胞增殖倍数、Ki67表达、侵袭细胞数、划痕闭合率、MMP-2、MMP-9和RAGE表达均降低(P均<0.01),pc-HMGB1组上述指标均升高(P均<0.01);与miR-381 mimic组相比,mimic+pc-HMGB1组细胞增殖倍数、Ki67表达、侵袭细胞数、划痕闭合率、MMP-2、MMP-9和RAGE水平也明显上升(P均<0.01).结论 miR-381通过靶向下调HMGB1表达,抑制IHH-4细胞增殖、侵袭和迁移.

关键词：miR-381、甲状腺乳头状瘤、增殖、侵袭、迁移

所属期刊栏目：40

分类号：R735.1;R394;R445.2

资助基金：前沿项目102300410010

在线出版日期：2019-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：843-848