抗血小板溶栓素对缺糖缺氧再灌注损伤大鼠原代皮质神经细胞保护作用

摘要：

目的 探讨抗血小板溶栓素(APT)对原培养大鼠皮质神经细胞缺糖缺氧损伤的保护作用及其机制.方法 大鼠原代皮质神经细胞培养6 d后,经APT 80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、Toll样受体4(TLR4)阻断剂HTA12510μg/mL预处理24 h,皮质神经细胞缺糖缺氧3 h,恢复正常培养24 h,建立缺糖缺氧再灌注损伤模型.实验分为正常组,模型组,APT低、中、高组,HTA组.倒置显微镜下观察细胞形态,免疫组化染色鉴定神经元.MTT法检测细胞存活率.比色法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性.G-LISA法检测细胞中Rho蛋白A(RhoA)活性,Western-bloting检测细胞中TLR4、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)蛋白表达水平.结果 细胞培养6 d后,免疫组化鉴定显示神经细胞纯度达90%以上;与模型组比较,APT低、中、高剂量能明显增加神经细胞存活率;中、高剂量能明显降低培养液中MDA含量和LDH活性,降低细胞中RhoA活性,抑制细胞中TLR4,ROCK1/2蛋白表达.结论 APT对大鼠原代皮质神经细胞缺糖缺氧再灌注损伤有较好的保护作用,其机制与抑制TLR4、RhoA、ROCK信号通路有关.

关键词：抗血小板溶栓素、神经细胞、Toll样受体4、Rho蛋白A、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1/2

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分类号：R285.5;Q57;R734.2

资助基金：安徽省自然科学基金1208085QH140

在线出版日期：2016-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：257-261