Sybr greenⅠ实时定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的探讨

摘要：

目的选择以Sybr greenⅠ作为荧光指示剂做实时PCR(SYBR法),检测乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA,并与国产TaqMan荧光实时定量PCR方法比较.方法对189例临床血清标本DNA分别进行常规PCR和Sybr greenⅠ荧光PCR检测.结果使用国产TaqMan荧光实时定量PCR方法测得106例HBV DNA阳性,67例阴性,16例判断困难.使用Sybr greenⅠ实时定量PCR方法测得117例HBV DNA阳性,72例阴性,使用Sybr greenⅠ实时定量PCR方法测得HBVDNA阳性熔解曲线Tm值为83.67±0.95℃.其中106例阳性和67例阴性与使用国产TaqMan荧光实时定量PCR方法所测阴阳性一致,二者定量的回归系数为0.941.使用国产TaqMan荧光实时定量PCR方法判断困难的16例中,11例Sybr greenⅠ实时定量PCR方法判断为阳性,但定量拷贝数很低,其中最大值为1.68×103拷贝/ml,最小值为4.37×102拷贝/ml,平均值为839拷贝/ml;另5例判断为阴性.结论使用SybrgreenⅠ荧光素进行实时定量PCR检测HBV DNA的敏感度要高于国产TaqMan的荧光实时定量PCR方法,能够适合目前临床上及时有效准确检测标本的要求.

关键词：聚合酶链式反应、荧光定量、肝炎病毒、熔解曲线

所属期刊栏目：26

分类号：R512.62;R446;R735.7

在线出版日期：2005-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：85-88