黄鳝体表粘液中基因组DNA的提取与分析

摘要：

黄鳝基因组DNA一直采用抽血或剪取肌肉来提取,但是采血或剪取肌肉后黄鳝成活率很低.为了保留亲本,尝试从黄鳝体表粘液中提取DNA,并采用紫外分光光度计对提取到的DNA的纯度和浓度进行了检测.结果表明,用蛋白酶K消化,酚仿抽提后从粘液中得到的DNA的纯度与从肌肉中提取到的相差不大,但是提取到的量较少.为了验证提取的DNA是不是黄鳝基因组DNA,用黄鳝actin引物和18S rRNA基因引物扩增之后检测到了粘液中的较亮的DNA片段.为了进一步确认检测到的是黄鳝的DNA,我们又对得到的DNA进行了扩增,并得到的产物进行了克隆和测序.结果表明,粘液中提取到的DNA是黄鳝的基因组DNA.随后又选择了60尾黄鳝,提取其粘液之后对其成活率进行统计,养殖1个月后黄鳝的成活率都在95％以上.此黄鳝体表粘液提取DNA方法能提取高质量的DNA,可用于用于PCR鉴定.

关键词：黄鳝、基因组DNA、粘液

所属期刊栏目：43

分类号：S917.4;S966.4(水产基础科学)

资助基金：江苏省科技支撑计划—农业部分项目BE2013315,江苏省自然科学基金资助项目BK2011184和中央级公益性科研院所基本科研业务费专项2015JBFM06共同资助.

在线出版日期：2016-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：305-308