1型鸭甲型肝炎病毒3D基因的原核表达与多抗制备

摘要：

根据血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)SH株3D基因序列设计并合成1对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增3D基因,将其克隆入原核表达载体pET-32a,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导培养下重组蛋白获得了成功表达.SDS-PAGE显示重组蛋白的分子量约为68 kD,Western blot分析显示该重组蛋白能与多聚组氨酸标签单抗发生特异性反应.将切胶后纯化的目的蛋白免疫ICR小鼠,制备针对重组蛋白的多抗血清,Western blot结果显示制备的抗血清能够与DHAV-1感染的SPF鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应.以上结果表明,3D基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的多抗血清可以用于3D蛋白的检测,为3D蛋白的功能研究奠定了基础.

关键词：鸭甲型肝炎病毒、3D基因、原核表达、抗血清

所属期刊栏目：42

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31302096,江苏省农业支撑项目BE2013415,江苏省自然科学基金项目BK2011536,江苏省”企业博士集聚计划”和江苏省”六大人才高峰项目”NY-009共同资助.

在线出版日期：2015-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：536-539