易错PCR对扩展青霉脂肪酶基因PEL的定向进化

摘要：

以带有野生型扩展青霉碱性脂肪酶cDNA全长的载体psk-lip07为模板,利用易错PCR技术以及高通量筛选,最终获得了一株最佳突变体GS-pPIC3.5K-lip07-ER04,其最适作用温度比野生型提高10℃,酶活提高了约22%,热稳定性Tm值也提高了3.28℃.基因测序结果表明,脂肪酶(PEL)第82位的Lys突变成Arg,第241位的Glu突变成Pro.

关键词：扩展青霉脂肪酶、易错PCR、最适作用温度、酶活、热稳定性

所属期刊栏目：17

分类号：Q556(酶)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30270033;福建自然科学基金重点资助项目B0120001;福建自然科学基金资助项目C0410009;福建省科技平台建设计划项目2006H0085

在线出版日期：2011-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：22-24