雾化吸入NaClO致小鼠肺损伤模型的构建及机制研究

摘要：

目的:建立次氯酸钠(NaClO)消毒剂诱导小鼠肺损伤模型,探讨其吸入毒性机制.方法:将0、75、150、300 μg/L的NaClO溶液雾化成细微液滴给小鼠静态吸入染毒5 min,染毒后24 h使用肺功能仪检测小鼠肺功能,眼眶取血,收集肺泡灌洗液(BALF)和肺组织.采用HE染色观察肺组织结构,透射电镜观察肺组织细胞内线粒体等细胞器形态,TUNNEL染色观察肺组织细胞凋亡情况.BCA法测BALF蛋白浓度,流式细胞术检测BALF中细胞数量,Western blot检测肺组织抗氧化酶、凋亡及自噬相关蛋白的相对表达量,ELISA试剂盒检测血清、BALF和肺组织匀浆中炎症相关蛋白含量,qPCR检测肺组织匀浆炎症和抗氧化酶相关基因的mRNA表达水平,试剂盒检测肺组织匀浆中MDA含量和SOD酶活性.结果:与对照组相比,75μg/L NaClO染毒组小鼠肺BALF中蛋白浓度变化不明显,150和300 μg/L NaClO染毒组BALF中蛋白浓度明显升高且细胞数量明显增多(均为P＜0.05),故后续选择150 μg/L NaClO作为研究浓度.与对照组相比,150 μg/L NaClO染毒组肺功能损伤明显(P＜0.05),肺组织匀浆中抗氧化酶SOD2和Nrf2的蛋白表达水平降低(P＜0.05),SOD2、Nrf2、CAT mRNA的表达水平降低(P＜0.05),肺组织中IL-1β和TNF-α在血清、BALF和肺组织匀浆中的浓度均升高(P＜0.05),肺组织匀浆中IL-1β和TNF-α mRNA相对表达量升高(P＜0.05),凋亡细胞数量明显增加,Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P＜0.05);且肺组织细胞线粒体明显肿胀,有自噬溶酶体出现,Beclin1蛋白表达水平升高(P＜0.05),P62蛋白表达水平降低(P＜0.01).结论:成功建立了 NaClO诱导小鼠肺损伤模型,并发现NaClO可诱导小鼠肺组织发生凋亡、氧化应激、炎症和自噬.

关键词：次氯酸钠、肺损伤、细胞凋亡、氧化应激、炎症、自噬

所属期刊栏目：36

分类号：R126.4(环境卫生、环境医学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;陕西省重点研发计划重点项目

在线出版日期：2024-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：281-287,297