特女贞苷对脂多糖诱导的巨噬细胞促炎反应的抑制作用及机制

摘要：

目的:探讨特女贞苷(NED)抑制细菌脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞促炎反应的机制.方法:用50 μmol/L NED处理RAW264.7巨噬细胞12h后,采用CCK-8法测定细胞活力,Annexin V-FITC/PI法测定细胞凋亡率,转录组测序分析异常基因表达,免疫荧光检测Nrf2蛋白表达定位.进一步使用100 ng/mL LPS(模型组)与不同浓度(0、12.5、25和50 μmol/L)NED联合处理RAW264.7细胞干预12h后,采用ELISA测定细胞上清液中TNF-α和IL-6含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞TNF-α和IL-6 mRNA的表达;分别采用DCFH-DA、MitoTracker-Green和JC-1染色测定细胞中活性氧、线粒体含量和膜电位;试剂盒测定细胞内抗氧化酶活力、线粒体复合物Ⅰ和Ⅲ活性以及ATP合成的变化.结果:与空白对照组相比,50 μmol/L NED对巨噬细胞存活和凋亡无明显影响(P>0.05),但可抑制模型组LPS诱导促炎因子TNF-α、IL-6的表达和分泌(P<0.05),并增强抗炎因子转录表达(P<0.05),呈现明显抗炎效应.与模型组比较,联合NED干预组增强Nrf2核转位及下游抗氧化因子转录表达(P<0.05),提高细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05),并降低活性氧(ROS)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平(P<0.05),减轻LPS刺激巨噬细胞氧化应激(P<0.05).此外,NED刺激线粒体生物合成基因表达升高(P<0.05),逆转LPS诱导线粒体膜电位、复合物Ⅰ和Ⅲ活性下降(P<0.05),促进线粒体数量增多和ATP合成(P<0.05).结论:特女贞苷能够激活Nrf2抗氧化系统,增强线粒体生物合成和代谢功能,抑制LPS诱导巨噬细胞促炎分化,具有成为抗炎症疾病候选药物的潜力.

关键词：特女贞苷、巨噬细胞、炎症反应、抗氧化、线粒体生物合成

所属期刊栏目：35

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金;陕西省重点研发计划;航空航天临床医学双一流建设引导专项后备人才扶持基金

在线出版日期：2023-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：245-252