CDC42抑制剂CASIN对食管癌细胞活力与迁移能力的抑制作用

摘要：

目的:研究细胞分裂周期蛋白42(CDC42)特异性抑制剂CASIN对食管癌细胞的活力、迁移能力,以及伪足形成的影响,并初步揭示其诱导细胞凋亡的分子作用机制.方法:根据CDC42蛋白表达情况将细胞分为4组,内源性CDC42高/氐表达组和外源性CDC42高/低表达组.首先采用Western blot检测9种食管癌细胞系中内源性CDC42蛋白表达情况,接着选用CDC42内源性高表达和低表达食管癌细胞系各2种,采用细胞活力分析实验和划痕实验检测CDC42抑制剂CASIN对食管癌细胞活力和迁移能力的影响,Western blot检测CASIN对凋亡酶蛋白Caspase-3的表达及其底物蛋白PARP的裂解情况.然后将构建的Flag-CDC42和GFP-CDC42重组表达载体转染到食管癌细胞中,分成外源性CDC42低表达和高表达组,采用细胞活力分析实验和划痕实验检测CASIN对食管癌细胞活力和迁移能力的影响;免疫荧光实验检测CASIN对食管癌细胞伪足形成的影响.结果:与对照组(0μmol/L的CASIN)比较,在内源性CDC42高/低表达的细胞组中,细胞活力分析和划痕实验发现,15～30 μmol/L的CASIN能明显抑制食管癌细胞的活力和迁移能力(P＜0.05);Western blot结果显示,CASIN能引起Caspase-3表达增加,裂解PARP增多,提示可能诱导了细胞凋亡的发生.与低表达CDC42的食管癌细胞对照组相比,外源性高表达CDC42的食管癌细胞在20 μmol/L CASIN作用时抑制程度显著增强(P＜0.05);免疫荧光实验结果显示CASIN对CDC42促进细胞的伪足形成具有抑制作用.结论:CASIN能使食管癌细胞活力和迁移能力明显下降,抑制细胞伪足形成,同时还可能诱导细胞发生凋亡.因此,CASIN有望被开发为一种新型的抗食管癌分子靶向药物.

关键词：细胞分裂周期蛋白42、CASIN、食管癌、抑制作用

所属期刊栏目：33

分类号：R735.1(肿瘤学)

资助基金：广东大学生科技创新培育专项资金资助重点项目;国家自然科学基金面上项目

在线出版日期：2021-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：136-142