10.3969/j.issn.1004-616x.2019.05.002
沉默表皮生长因子受体的表达对肺腺癌A549细胞自噬的影响
目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细胞EGFR的表达,将A549细胞分为4组,即未处理组、EGFR siRNA-1组、EGFR siRNA-2组和EGFR siRNA-3组,分别采用Real-time RT-PCR和Western blot方法检测EGFR mRNA和蛋白表达水平来评价3个siRNA的沉默效果;将A549细胞分为转染EGFR siRNA组、转染空载体组、转染试剂组(只加入等量转染试剂)及未处理组,且4组均加入等量的50 ng/mL EGF,用Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,观察沉默EGFR表达对自噬活性变化;A549细胞分为转染EGFR siRNA组和转染空载体组,用透射电子显微镜观察自噬小体.结果:转染siRNA后A549细胞EGF蛋白的表达降低,LC3Ⅰ向LC3Ⅱ的转化水平升高(P<0.05),细胞内出现较多自噬小体,自噬活性明显增加.结论:降低EGFR的表达可以提高肺腺癌A549细胞自噬活性.
表皮生长因子受体、肺腺癌、自噬、siRNA、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ
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R730.2(肿瘤学)
河北省医学科学研究重点课题20110118
2019-10-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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