流体动力学基因转染技术构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型

摘要：

目的:构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型,为研究HBx在HBV感染相关原发性肝细胞癌发生中的分子机制奠定基础.方法:8只6～8周龄雄性CD-1小鼠,尾静脉注射真核表达质粒pcDNA-HBx及空载体pcDNA3.0,6～8 h处死小鼠并收集肝组织,抽提RNA及蛋白.RT-PCR和Western blot检测HBx表达情况;实时荧光定量PCR检测FXR靶基因SHP和Cyp7a1的mRNA表达.结果:核酸和蛋白水平上,pcDNA-HBx注射组小鼠肝脏内均可检测到HBx的表达;空载体对照组肝组织中未检测到HBx的表达;肝组织中瞬时过表达的HBx可以有效调控FXR通路下游靶基因SHP和Cyp7a1的mRNA表达.结论:成功实现了HBx在小鼠肝脏中的瞬时高表达,为今后整体水平上研究HBx提供了有效的动物模型.

关键词：流体动力学、基因瞬时表达、尾静脉注射、HBx

所属期刊栏目：29

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省科技计划项目2014A020212285;汕头大学2015年"创新强校工程"专项资金建设项目922-38040216;广东省高水平大学重点学科建设项目2015060,2016026,2015089

在线出版日期：2017-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：387-389,393