甲醛对人肝癌细胞株HepG2内质网应激相关Bip和CANX mRNA及蛋白表达水平的影响

摘要：

目的:研究甲醛(FA)染毒是否会诱导人肝癌细胞株HepG2内质网应激相关基因Bip和CANX mRNA和蛋白表达水平的改变,引起内质网应激反应.方法:用Hoechst 33258进行核染色,以观察不同浓度(0、0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L)FA分别染毒肝细胞株24和48 h后的细胞核形态学变化.再分别用0.004、0.02、0.1 mmol/L的FA处理人肝癌细胞株HepG2细胞24 h和48 h后,采用荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测内质网应激相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)及钙连蛋白(CANX)mRNA和蛋白的表达水平.结果:Hoechst 33258染色结果表明,染毒24和48 h后,0.5、2.5、12.5 mmol/L FA组出现大量核呈固缩状态或颗粒状荧光死亡细胞,阴性对照组和0.1 mmol/L及以下剂量组细胞核荧光染色较浅,细胞核未固缩,故后续试验采用0.1 mmol/L及以下剂量.经0.004、0.02和0.1 mmol/L FA处理细胞24和48 h后,qPCR检测结果显示,甲醛各剂量染毒组Bip和CANX的mRNA表达量与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).Western blot结果表明,染毒24 h,不同剂量甲醛处理组与阴性对照组相比,Bip和CANX蛋白表达量均无显著差异(P>0.05);染毒48 h,与阴性对照组相比,各FA处理组Bip蛋白表达量升高,0.02和0.1 mmol/L FA处理组CANX蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:甲醛染毒可诱导HepG2细胞内质网应激相关蛋白Bip和CANX表达水平升高,引起肝细胞发生内质网应激反应.

关键词：甲醛、内质网应激、肝细胞、免疫球蛋白重链结合蛋白、钙连蛋白

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分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：山西省回国留学人员科研资助项目2014-034;山西省留学回国人员科技活动择优资助项目晋人社厅函〔2014〕376号

在线出版日期：2017-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：340-345,351