Pokemon基因干扰对泌乳素腺瘤细胞的影响及其分子机制

摘要：

目的:探讨原癌基因pokemon干扰对泌乳素腺瘤细胞的影响及其分子机制,为可能的泌乳素腺瘤分子靶向治疗提供依据.方法:从泌乳素腺瘤患者手术切除的肿瘤组织中分离培养原代肿瘤细胞,利用siRNA技术构建pokemon稳定干扰泌乳素腺瘤细胞系(siRNA1、siRNA2和siRNA3),采用荧光定量PCR及Western blot验证pokemon的表达;同时运用CCK8检测pokemon基因干扰对泌乳素腺瘤细胞增殖的影响.采用Western blot检测在泌乳素腺瘤组织及siRNA稳定干扰细胞中pokemon对下游cyclin-A、p14ARF和p21蛋白表达的影响.结果:3株pokemon基因干扰泌乳素腺瘤细胞均构建成功.与空白质粒对照组比较,干扰组的细胞增殖能力均较对照组明显减弱(P均＜0.05),且siRNA2干扰效率最高.与正常泌乳素腺组织比较,泌乳素腺瘤组织中pokemon蛋白表达明显增加(P=0.042),而其下游蛋白p14ARF、cyclin-A以及p21表达均显著降低(P均＜0.05).与空白质粒对照组比较,在siRNA2干扰组细胞中p14ARF、cyclin-A和p21蛋白表达水平均明显升高(P均＜0.05).结论:pokemon基因干扰可上调泌乳素腺瘤细胞中肿瘤相关抑制因子的表达,提示pokemon可能作为泌乳素腺瘤治疗的潜在靶位点.

关键词：泌乳素腺瘤、原代培养、pokemon、细胞增殖、cyclin-A、p14ARF、p21

所属期刊栏目：28

分类号：R736.4(肿瘤学)

资助基金：深圳市科技研发项目JCYJ20130402111321450

在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：190-194