一种简便的高通量细胞内GFP报告基因检测方法

摘要：

目的：建立一种简单、快速、高通量的检测GFP蛋白的方法。方法：用TECAN多功能酶标仪Infinite M200pro检测GFP蛋白在不同缓冲液中的荧光强度；用酶标仪检测含GFP的蛋白样品梯度稀释后的荧光强度，建立荧光强度与GFP相对含量之间的标准曲线；分别比较荧光酶标仪的检测结果与流式细胞术和Western-blotting检测结果的相关性。结果：使用50 mmol/L Tris-HCl(pH=10)的缓冲液稀释GFP蛋白更有利于检测低浓度的GFP；荧光酶标仪检测GFP的荧光读数同GFP相对含量之间的回归系数2R>0.99。荧光酶标仪检测GFP蛋白的结果与流式细胞术、Western-blotting的检测结果之间均呈现明显的相关性。结论：建立的利用多功能酶标仪检测GFP蛋白方法方便快捷，可以实现短时间对大样本进行检测。

关键词：绿色荧光蛋白、报告基因、高通量检测、多功能酶标仪

分类号：Q291

资助基金：国家自然科学基金81571994，81570567；教育部留学回国人员科研启动基金第49批；广东省自然科学基金2014A030313483，2015A030313447；汕头大学医学院李嘉诚基金

在线出版日期：2015-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：394-398,403