肝脏型脂肪酸结合蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

目的：制备抗肝脏型脂肪酸结合蛋白(LFABP)的单克隆抗体(mAb)并进行亚型和特异性鉴定。方法：以重组的LFABP蛋白为免疫原，经过原核表达和纯化后，免疫BALB/c小鼠，获得分泌鼠抗人LFABP蛋白mAb的杂交瘤细胞株，通过ELISA和Western blot方法检测其特异性。结果：纯化的LFABP重组蛋白免疫小鼠后经过筛选得到2株稳定分泌抗人LFABP的mAb杂交瘤细胞株，分别命名为3E6和5B7，其亚型分别为IgG1和IgG2a，抗体经纯化后浓度达到2 mg/mL，效价达到1∶10000以上。Western blot分析结果表明可与细胞中表达的内源LFABP发生特异性免疫反应。结论：成功制备了鼠抗人LFABP的mAb，为进一步研究LFABP的生物学特性，并为相关疾病的治疗奠定了基础。

关键词：肝脏型脂肪酸结合蛋白、原核表达、杂交瘤、单克隆抗体

分类号：R5 ;R39

资助基金：河南省重点科技攻关项目092102310006;河南城建学院校内基金2010JYB009

在线出版日期：2014-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：218-220,224