慢病毒介异的孕烷X受体sh-RNA稳定干扰HepG2细胞株的构建

摘要：

目的：构建慢病毒介导的人孕烷X受体(hPXR) sh-RNA干扰载体及筛选肝癌细胞稳定干扰株。方法：针对hPXR的特异性序列，设计干扰序列，构建重组克隆。转染HEK293T细胞，筛选有效干扰片段。HEK293T包装干扰病毒并转染肝癌HepG2细胞株，200 mmol/L嘌呤霉素筛选2-3周，Western blot检测PXR表达。hPXR激动剂利福平处理PXR sh-RNA稳定干扰肝癌HepG2细胞株和Scramble对照细胞，抽提RNA并鉴定hPXR靶基因细胞色素P4503A4(CYP3A4)的表达。结果：筛选出了PXR有效干扰片段，并获得了PXR信号通路有效敲低的HepG2慢病毒稳定干扰株。结论：成功构建了慢病毒介导的PXR sh-RNA稳定干扰HepG2细胞株。

关键词：人孕烷X受体、原发性肝细胞癌、慢病毒、RNA干扰

分类号：R365(病理学)

资助基金：中国博士后科学基金2012M510200;广东省自然科学基金S2012010010955;广东省医学科研基金A2013656;中央财政支持地方高校发展专项资金

在线出版日期：2014-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：209-212