10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.002
铅和镉对人胎盘绒毛癌细胞中S100钙结合蛋白成员mRNA表达的影响
目的:探讨重金属铅(Pb)和镉(Cd)对人胎盘绒毛癌细胞(JAR)中一组S100钙结合蛋白家族成员mRNA表达的影响.方法:采用四甲基噻唑蓝(MTT)实验分别检测乙酸铅(PbAc)和乙酸镉(CdAc)对JAR增殖活力的影响.再进一步采用小于半数致死量的不同浓度的PbAc和CdAc分别染毒JAR细胞24h和48 h,运用半定量RT-PCR检测各染毒组与对照组[金属硫蛋白(MT)为参照,β-actin为内参]S100钙结合蛋白家族成员mRNA的表达水平.结果:PbAc (2.5 ~ 20μmol/L)和CdAc (2.5~ 10 μmol/L)染毒24h后对JAR细胞的相对存活率与染毒浓度呈剂量效应关系,且呈线性负相关(r依次为-0.992 4和-0.995 5,P均<0.05),半数致死浓度PbAc为23.15μmol/L,CdAc为8.30μmol/L.半定量RT-PCR检测9个钙结合蛋白S100家族成员,仅发现S100A10、S100A11、S100A14和S100P有明显表达,其余的S100成员表达较弱或未能检出.染毒24h和48 h后,与对照组比较,S100A10和S100A11mRNA的表达未发生明显变化,但S100A14 mRNA的表达(除10μmol/L PbAc染毒24 h外)明显上调(P<0.05或P<0.01).S100P的表达经2.5和5μmol/L PbAc染毒24 h后明显上调(P<0.05或P<0.01),但随PbAc浓度增高表达有降低的趋势.而经CdAc染毒24h后各实验组S100P的表达均明显上调(P<0.05或P<0.01);经染毒48 h后的表达进一步增加,但与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).S100P的表达与MT对照的结果相类似.结论:PbAc或CdAc染毒JAR细胞可引起S100A14和S100P mRNA的表达发生明显的变化,其中S100P的变化规律与MT的表现类似,推测这两种钙结合蛋白在重金属毒作用过程中有参与保护细胞的重要作用,可作为细胞应激的分子生物指标.
乙酸铅、乙酸镉、人胎盘绒毛癌细胞、S100钙结合蛋白
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R734.2(肿瘤学)
广东省自然科学基金2009-9151503102000039;广东省医药卫生科研基金A2009430
2012-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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