HIV-1 gag基因经卵母细胞垂直传递模型的建立

摘要：

目的:建立HIV-1 gag基因经卵母细胞垂直传递的模型,为HIV通过雌性生殖细胞垂直传递的研究奠定实验基础.方法:将含有HIV-1 gag基因的重组质粒pIRES2-EGFP-gag注射到小鼠双侧卵巢,转染生殖细胞.应用超排获得实验用卵母细胞,收集显示绿色荧光的卵母细胞,将一部分呈现绿色荧光的卵母细胞裂解,提取基因组DNA,采用PCR检测gag DNA是否存在卵母细胞中;再将另一部分带有绿色荧光的卵母细胞常规制备中期染色体片,用荧光原位杂交(FISH)技术检测HIV-1 gag基因在成熟卵母细胞染色体上的整合. 结果:转染pIRES2-EGFP-gag后,在荧光显微镜下能够很清楚地看到带有绿色荧光的卵母细胞;PCR结果显示在带有绿色荧光的卵母细胞中可检测到HIV-1 gag基因特异的阳性条带;FISH检测结果显示在卵母细胞的中期染色体上检测到HIV-1 gagDNA的阳性信号.结论:HW-1 gag基因能够通过卵透明带和细胞膜并整合到卵母细胞基因组内,本研究为HIV-1 gag基因可经过雌性生殖细胞垂直传递给子代奠定了实验基础.

关键词：HIV-1 gag基因、垂直传递模型、小鼠卵母细胞

所属期刊栏目：22

分类号：R511(传染病)

在线出版日期：2010-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：39-42